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MALADIE DE HUNTINGTON

RECHERCHE FONDAMENTALE

Modèles cellulaires

Culture primaire de neurones du cortex et /ou du striatum (embryons de souris ou rat)

- Evaluation de la neuro-dégénérescence induite par traitement chimique/toxines (quinolinate, glutamate, acide 3-nitropropionique), entraînant stress oxydatif, atteinte mitochondriale et excitotoxicité.

- Evaluation de la neuro-dégénérescence après injection de vecteurs lentiviraux codants différents fragments de la huntingtine mutante

- Evaluation de la neuro-dégénérescence dans les cultures primaires de neurones/astrocytes embryonnaires de souris transgéniques Huntington (transgéniques et/ou knock-in)

Cellules de lignée humaine de patients HD (ESC ou IPSC)

- Identification des mécanismes de mort/dysfonctionnement cellulaire pour déterminer de nouvelles cibles thérapeutiques potentielles

- Evaluation des approches médicamenteuses ou de transfert de gènes sur la mort cellulaire induite par traitement chimique/toxines induisant l'apoptose, le stress oxydatif, et une atteinte mitochondriale


Modèles animaux

Modèles murins

Modèles neurotoxiques

Lésions excitotoxiques de rats ou souris par injection intrastriatale de quinolinate (ou d'un autre agoniste du glutamate)

- Evaluation des symptômes et/ou de l'effet neuro-protecteur des thérapies géniques ou médicamenteuses

- Evaluation de stratégies réparatrices (cellulaires, géniques, médicamenteuses) sur les symptômes d'animaux chroniquement lésés

- Développement de nouvelles modalités d'imagerie pour le monitoring in vivo de divers processus de maladie (neuro-inflammation, marqueurs de la mort cellulaire,..)

Modèle d'atteinte mitochondriale progressive (acide 3-nitropropionique) chez le rongeur par administration systémique

- Evaluation des stratégies neuro-protectrices pharmacologiques ou géniques

- Evaluation de stratégies réparatrices (cellulaires, géniques, médicamenteuses) sur les symptômes d'animaux chroniquement lésés

- Suivi longitudinal des traitements neuro-protecteurs et /ou symptomatiques des animaux chroniquement lésés

- Développement de nouvelles modalités d'imagerie pour le monitoring in vivo de divers processus de maladie (neuro-inflammation, marqueurs de la mort cellulaire,..)

Modèles génétiques

Modèle de dégénérescence progressive et focale par vecteurs AAV et lentiviraux codant la huntingtine mutante injectés dans le striatum (souris et rats)

- Evaluation des stratégies neuro-protectrices pharmacologiques ou géniques (histologie, transcriptomique, biochimie)

- Développement de nouvelles modalités d'imagerie pour le monitoring in vivo de divers processus de maladie (neuro-inflammation, marqueurs de la mort cellulaire,..)

Modèles transgéniques de dégénérescence progressive et de dysfonctionnement chez la souris (par exemple KI140CAG)

- Evaluation des stratégies neuro-protectrices pharmacologiques ou géniques (histologie, transcriptomique, biochimie)

- Développement de nouvelles modalités d'imagerie pour le monitoring in vivo de divers processus de maladie (neuro-inflammation, marqueurs de la mort cellulaire,..)

Vecteurs lentiviraux et AAV pour obtenir une preuve de concept de cibles thérapeutiques dans différents modèles génétiques de HD

- Invalidation des gènes cibles (stratégie ShRNA)

- Surexpression de protéines recombinantes


Outils de recherche fondamentale

Biochimie et Protéomique

- Analyses Quantitatives par "western blot"

- ELISA

Transcriptomique

- MicroArray

- RNA seq

Microscopie

- Video-microscopie en temps réel

- Microscopes épifluorescence robotisés

- Microscopie confocale

RECHERCHE PRECLINIQUE

Modèles cellulaires

Culture primaire de neurones du cortex et /ou du striatum (embryons de souris ou de rat)

- Evaluation de la neuro-dégénérescence induite par traitement chimique/toxines (quinolinate, glutamate, acide 3-nitropropionique) entraînant stress oxydatif, atteintes mitochondriales et excitotoxicité.

- Evaluation de la neuro-dégénérescence après injection de vecteurs lentiviraux codant différents fragments de la huntingtine mutante

- Evaluation de la neuro-dégénérescence dans les cultures primaires de neurones/astrocytes embryonnaires de souris transgéniques Huntington (transgénique et/ou knock-in)

Cellules de lignée humaine de patients HD (ESC or IPSC)

- Identification des mécanismes de mort/dysfonctionnement cellulaire pour déterminer de nouvelles cibles thérapeutiques potentielles

- Evaluation des approches médicamenteuses ou de transfert de gènes sur la mort cellulaire induite par traitement chimique/toxines induisant l'apoptose, le stress oxydatif, et une atteinte mitochondriale

Modèles animaux

Modèles murins

Modèles neurotoxiques

Lésions excitotoxiques de rats ou souris par injection intrastriatale de quinolinate Evaluation de la neuro-protection des thérapies géniques ou médicamenteuses

- Evaluation de stratégies réparatrices (cellulaires, géniques, médicamenteuses) sur les symptômes d'animaux chroniquement lésés

- Développement de nouvelles modalités d'imagerie pour le monitoring in vivo de divers processus de maladie (neuro-inflammation, marqueurs de la mort cellulaire,..)

Modèle d'atteinte mitochondriale progressive (acide 3-nitropropionique) chez le rongeur par administration systémique

Modèles génétiques

Modèle de dégénérescence progressive et focale par vecteurs AAV et lentiviraux codant la huntingtine mutante injectée dans le striatum (souris et rats)

- Evaluation des stratégies neuro-protectrices pharmacologiques ou géniques (histologie, transcriptomique, biochimie)

- Développement de nouvelles modalités d'imagerie pour le monitoring in vivo de divers processus de maladie (neuro-inflammation, marqueurs de la mort cellulaire,..)

Modèles transgéniques de dégénérescence progressive et de dysfonctionnement chez la souris (par exemple KI140CAG)

- Evaluation des stratégies neuro-protectrices pharmacologiques ou géniques (histologie, transcriptomique, biochimie)

- Développement de nouvelles modalités d'imagerie pour le monitoring in vivo de divers processus de maladie (neuro-inflammation, marqueurs de la mort cellulaire,..)

Modèles primates non humains

Modèles neurotoxiques

Lésions excitotoxiques de macaques par injection intrastriatale de quinolinate (ou d'un autre agoniste du glutamate)

- Evaluation de l'effet neuro-protecteur des thérapies géniques ou médicamenteuses

- Evaluation de stratégies réparatrices (cellulaires, géniques, médicamenteuses) sur les symptômes d'animaux chroniquement lésés

- Développement de nouvelles modalités d'imagerie pour le monitoring in vivo de divers processus de maladie (neuro-inflammation, marqueurs de la mort cellulaire,..)

Modèle d'atteinte mitochondriale progressive (acide 3-nitropropionique) par administration systémique

- Evaluation des stratégies neuro-protectrices pharmacologiques ou géniques

- Evaluation de stratégies réparatrices (cellulaires, géniques, médicamenteuses) sur les symptômes d'animaux chroniquement lésés

- Suivi longitudinal des traitements neuro-protecteurs et /ou symptomatiques des animaux chroniquement lésés

- Développement de nouvelles modalités d'imagerie pour le monitoring in vivo de divers processus de maladie (neuro-inflammation, marqueurs de la mort cellulaire,..)

Modèles génétiques

Modèle de dégénérescence progressive et focale par vecteurs AAV et lentiviraux codant la huntingtine mutante injectée dans le putamen

- Evaluation des stratégies neuro-protectrices pharmacologiques ou géniques (histologie, transcriptomique, biochimie, tests comportementaux)

Modèle de dégénérescence progressive et focale par vecteurs AAV codant la huntingtine mutante injectée dans le noyau caudé ou le putamen

- Evaluation des stratégies neuro-protectrices pharmacologiques ou géniques (histologie, transcriptomique, biochimie, tests comportementaux et cognitifs)

- Développement de nouvelles modalités d'imagerie pour le monitoring in vivo de divers processus de maladie (neuro-inflammation, marqueurs de la mort cellulaire,..)



Outils d'analyse biologique - recherche préclinique

Biochimie and Protéomique

- Analyses Quantitatives par Western blot

- ELISA

Transcriptomique

- MicroArray

- RNA seq

Microscopie et histologie

- Neuropathologie (certification européenne)

- Immunohistochimie / immunofluorescence

- Analyses stéréologiques non-biaisées, morphométrie quantitative et histologie 3D

- Scanner de lames haut débit (fond clair et fluorescence)

-Automated epi-fluorescence microscopes

- Microscopie confocale

Tests comportementaux - rongeurs et primates non humains

Rongeurs :

- Analyse (images vidéo) du comportement (CatWalk, Rotarod) , et évaluation cognitive (Morris water maze test, Novelty, Avoidance test, etc.)

Primates :

- Analyse (images vidéo) du comportement moteur (Ethovision/ The Observer)

- Batterie de tests cognitifs utilisant des tâches sur écran tactile sur individu isolé ou en groupe social (batterie CANTAB pour primate non humain (DNMS, DMS, IEDS, CSST, Memory 30, Visual Discrimination Task, etc.

Outils d'imagerie cérébrale préclinique

- Imagerie paramétrique du métabolisme énergétique : 18F-FDG

- Imagerie paramétrique de la neuro-inflammation : 18F-DPA714

- Modélisation compartimentale et imagerie paramétrique, fonction d'entrée automatisée, co-registration TEP/IRM

- MRI 11.7T & 7T :

* Imagerie pondérée T2

* DTI - modèles murins

* Spectroscopie localisée du proton, quantification par LC Model

* CEST- imagerie du glutamate - modèles murins

* Spectroscopie de diffusion des différents métabolites NAA, Glu, Gln, etc.

Analyses post-mortem (rongeurs et primates non humains)

- Immunohistochimie

- Hybridation in situ

- Reconstruction 3D des volumes cérébraux histologiques (imagerie multimodale)

- Co-registration 3D In vivo/post-mortem des images TEP/IRM et des volumes cérébraux d'immunohistochimie

- Détection biochimique des biomarqueurs de maladie dans les fluides biologiques (dont sang et LCR)

RECHERCHE CLINIQUE

Unité de neurologie cognitive et Centres d'Investigation Clinique

- Cohortes de patients (Réseau Huntington de Langue Française)

- CIC Pitié-Salpêtrière

- CIC Henri Mondor

- Unité de neurologie cognitive et Service de Neurochirurgie, Hôpital Henri Mondor, Créteil : Forte spécialisation en biothérapies (thérapie cellulaire, thérapie génique) et en essais médicamenteux

- Centre de référence national maladie de Huntington (coordination AC Bachoud-Lévi) hôpitaux Henri Mondor (prise en charge, soins, essais thérapeutiques), la Salpêtrière (génétique, biomarqueurs), Armand Trousseau (prise en charge enfants), Albert Chenevier (F. Louarn, prise en charge formes évoluées)

- Développement d'outils de suivi clinique (cognitifs)


Imagerie TEP clinique (3 sites)

Site IHU Neuroscience Translationnelle

- Mesure de l'atteinte striatale par IRM (IRM 1.5T & 3T), 7T pour les sujets contrôles

Site SHFJ

- Evaluation du système dopaminergique (multiples essais multicentriques)

- Marqueur des récepteurs dopaminergiques D2 : 11C-raclopride

- Marqueur du métabolisme glucidique : 18F-Fluorodeoxyglucose

- Marqueur de la neuro-inflammation : 18F-DPA714

- TEP/MRI hybrid et TEP/CT hybrid

Henri Mondor

- TEP/MRI hybrid


Plateforme du mouvement

Etude du mouvement